TÉCNICAS DE PCR EN EL DIAGNÓSTICO DE VIH-1 EN INFANTES

 

TEMA: Diagnóstico de VIH-1 en infantes

OBJETIVO: Establecer el diagnóstico temprano de la infección por VIH-1 en niños nacidos de madres VIH-1 seropositivas mediante la técnica de Reacción en Cadena de la Polimerasa de ADN del VIH-1.

MUESTRA: Sangre periférica

TIPO DE ÁCIDO NUCLEICO: ADN viral

EXTRACCIÓN (LISIS, SEPARACIÓN, PURIFICACIÓN): Durante el procesamiento de la muestra se lisó las células sanguíneas, se liberó la hemoglobina y se purificó la muestra con el reactivo de purificación.

GENES A ANALIZAR: Gen de la transcriptasa reversa del VIH-1 (POL VIH-1)

TAMAÑO EN PARES DE BASE: Fragmentos de 665 pb para el gen POL y 350 pb para el gen de la β-globina humana.

TIPO DE PCR: Reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa inversa (RT-PCR)

PASOS

DESNATURALIZACIÓN: 94°C por 5 min

HIBRIDACIÓN: 55°C por 30 seg

ELONGACIÓN: 72°C por 1 min

VISUALIZACIÓN (ELECTROFORÉSIS)

Bibliografía:

- de Rivera, I. L. (2003). Aplicación del PCR-ADN en el diagnóstico de la infección por VIH-1 en infantes. Recuperado de: http://cidbimena.desastres.hn/RMH/pdf/2003/pdf/Vol71-3-2003-3.pdf